期刊简介
本刊报道血液学基础研究和临床应用研究论文，包括实验血液学，分子血液学，临床血液学，肿瘤血液学，免疫血液学，移植血液学，输血学，止血与栓塞，血液病新药和新诊疗措施等。本刊面向生物医学科研单位学者、医学院校相关教学人员和临床医务工作者。本刊设“论著”，“研究报告”和“综述”三大栏目。血液学领域的中高级科技人员为本刊主要撰稿群和读者群。
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首页>中国实验血液学杂志
- 杂志名称：中国实验血液学杂志
- 主管单位：实验血液学杂志
- 主办单位：中国科学技术协会
- 国际刊号：11-4423/R
- 国内刊号：11-4423/R
- 出版周期：双月刊
期刊荣誉：中国期刊全文数据库(CJFD)期刊收录：国家图书馆馆藏, 上海图书馆馆藏, 维普收录(中), 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 知网收录(中), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 文摘与引文数据库, 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), CA 化学文摘(美), 万方收录(中)
新型重组IL6D24-PE40KDEL外毒素融合蛋白的理化分析
崔建武；郭斯启；孙玉英；刘楠；梁飞；奚永志
关键词：外毒素融合蛋白, IL6D24-PE40KDEL, 纯化鉴定
摘要：为了对构建成功的新型重组IL6D24-PE40KDEL外毒素融合蛋白的部分物化表征进行分析鉴定,采用Edman法、SDS-PAGE法、胰蛋白酶消化的MALDI-TOF-MS质谱法、蛋白印迹法和MTT法分别测定该融合蛋白的N-末端6个氨基酸、相对分子量、肽谱、抗原特异性以及靶向杀伤生物学活性.结果表明:所构建表达纯化的新型重组IL6D24-PE40KDEL外毒素融合蛋白N末端6个氨基酸序列为Met-Ile-Asp-Lys-Gln-Ile-,而IL-6缺失24个氨基酸后的原序列为Ile-Asp-Lys-Gln-Ile-,由于采用了大肠杆菌表达系统,因此在N末端第1位多出了1个Met,经12%SDS-PAGE蛋白电泳和凝胶成像系统分析计算,其相对分子量为58.75 kD,与理论值56.9 kD相比误差在5%之内.MALTI-TOF-MS质谱测定共获得10个与理论预测值相符的肽段,经瑞士生物信息研究所的EXPASY分子生物服务网站的Peptident数据库搜索证明,在分子量为57 kD左右的范围内未检索到与上述条件相符的已知蛋白,证明本融合蛋白为全新蛋白,与预测的目的蛋白相符.WB实验显示II6D24-PE40KDEI外毒素融合蛋白能与IL-6及PEA抗体特异性结合.MTT生物活性测定表明,该融合蛋白对表达IL-6R的多发性骨髓瘤细胞系U266产生特异性杀伤,而对不表达IL6R的CEM淋巴细胞系无任何杀伤.结论:所研制成功的重组IL6D24-PE40KDL外毒素融合蛋白的确为一全新的具有靶向杀伤生物活性的蛋白质,与设计的完全一致,同时也证实了构建策略的可行性.
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